藍莓的栽培培養(yǎng)和繁殖論文
藍莓（Blueberry）又名越橘，屬于杜鵑花科越桔屬（Vaccinium），原產(chǎn)北美，多年生落葉或常綠果樹，分為高叢藍莓、矮叢藍莓、半高叢藍莓和兔眼藍莓.果實深藍色，甜酸適度，富含氨基酸，抗氧化能力列所有果品之首，堪稱“世界水果之王”，被國際糧農(nóng)組織列為五大健康食品之一[1].目前，國際市場上藍莓果實售價昂貴，處于供不應求的狀態(tài)[3].全世界有20多個國家和地區(qū)開始藍莓產(chǎn)業(yè)化栽培.遼寧丹東地區(qū)起步較晚，于1997年開始引種試栽，當時引進藍莓品種約有50多個，主要來源美國、加拿大，現(xiàn)已篩選出適合本地區(qū)栽培的品種有5個.由于確定主栽品種之初數(shù)量有限，我們用組織培養(yǎng)技術加快繁殖，為主栽品種的推廣提供一條有效、快捷的途徑.
1試驗材料與方法
1.1材料來源選取4年生藍莓半木質化嫩莖、已木質化的老莖和冬季休眠枝水培芽作為試材，于2007年分3次采自遼寧省森林經(jīng)營研究所苗圃基地，組培試驗于2007年在本所組培中心實驗室進行.
1.2試驗方法
1.2.1試驗程序外植體處理→接種→增殖培養(yǎng)→生根培養(yǎng)→移栽.
1.2.2外植體處理切取3cm帶頂芽或腋芽的幼嫩莖段去葉片留葉柄→流水沖洗60min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒3~7min→無菌水沖洗4~5次→用濾紙吸去水分→將莖段切成1~2個腋芽的小段.
1.2.3培養(yǎng)基制作以MS為基本培養(yǎng)基，按激素6—BA、NAA、ZT含量的不同，誘導增殖培養(yǎng)基設4系列處理（培養(yǎng)基1~4號），生根培養(yǎng)基設2系列處理（培養(yǎng)基5~6號），培養(yǎng)基配方見表1.表1中培養(yǎng)基蔗糖含量：分化和繼代培養(yǎng)基為30g/L，生根培養(yǎng)基為25g/L.瓊脂8.5g/L，pH值5.6~5.8，在115MPa氣壓下滅菌20min.
1.2.4培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度22~25℃，每天光照16h，光強2000lx.
2結果與分析
2.1外植體誘導培養(yǎng)接種在初代培養(yǎng)基上的外植體在接種4天后陸續(xù)出現(xiàn)污染，接種15天后污染基本結束；莖段基部膨大，葉腋處萌發(fā)出側芽，生長狀態(tài)隨培養(yǎng)基不同而不同.休眠枝的采集應在當年12月底至次年休眠芽萌動前為宜；水培時應將水溫控制在20℃左右，每隔2~3天換水，并對枝條下部進行清洗修剪.芽長到2~3cm時就可以接種.對于工廠化育苗來說，年繁殖數(shù)達到百萬株或者更多，就要求在各個季節(jié)和時間相互補充，才能不斷滿足生產(chǎn)，在用室外嫩莖和老莖做外植體時，應充分考慮污染因素，采取有效措施降低污染率.
2.2外植體增殖培養(yǎng)在培養(yǎng)基的選擇上，我們曾試過MS、LS、N6、WPM等7種培養(yǎng)基，結果發(fā)現(xiàn)還是1/3MS培養(yǎng)效果最好，為此，我們選定1/3MS為試驗的基本培養(yǎng)基.激素選擇上，我們最初使用6—芐基腺嘌呤（6—BA）和糠基腺嘌呤（激動素KT），但是所示的幾個常用濃度對藍莓試管苗的`增殖幾乎無效，接種的外植體，有的長時間不生長，有的只長出愈傷組織，有的長出小葉逐漸色壞死.后來我們選用了價格很昂貴的玉米素6—（4羥基—3—甲基—2—反式—丁烯基氨基）嘌呤，試驗使用濃度0.5~3.0mg/L.結果表明，玉米素濃度超過2.0mg/L，接種的外植體莖段萌芽迅速，但長勢不正常，顯示所用濃度偏高.因此玉米素濃度在1.0~2.0mg/L范圍內都比較適合.外植體培養(yǎng)20d左右，在A3、A4系列培養(yǎng)基中均有腋芽萌動并逐漸伸長生長，待組培苗長到4~5cm時，采用微枝扦插和叢芽增殖相結合的增殖方式，將長芽分切成帶1~2個芽的莖段，基部叢芽剝成幾塊轉入增殖培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng)，使其繼續(xù)分化出芽.50d左右腋芽基部又能形成叢生芽.組培苗在A3系列培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)增殖分化的苗數(shù)量多且健壯，繁殖系數(shù)在8倍左右.綜上所述，用A3系列培養(yǎng)基中1/3MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.5mg/L進行增殖培養(yǎng)較為理想，一般在2個周期（40~50d）增值系數(shù)即能達到8倍以上.
2.3生根培養(yǎng)在無菌狀態(tài)下，選擇健壯的小苗切割成高2cm左右的莖段，轉入不同生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，結果表明在1/4MS中的小苗生根率均明顯優(yōu)于全量MS培養(yǎng)基，所用激素以IBA0.5mg/L效果最好，生根率達100%且每株可生5~10條根；所需天數(shù)最少，根條數(shù)最多，并且根系生長情況最好，所以1/4MS+IBA0.5mg/L培養(yǎng)基為最適生根培養(yǎng)基.同時，在溫室煉苗時，我們進行了瓶外生根試驗，從常用生根藥劑種選擇吲哚丁酸和萘乙酸，用不同濃度浸根，處理后20天結果表明，NAA對藍莓沒有明顯催根作用，而IBA5~10mg/L催根效果都很好，生根率高、發(fā)根多、根系長，20mg/L則基部膨大，發(fā)根短，表明濃度偏高.瓶外生根更適合于工廠化生產(chǎn)，可以簡化程序和操作方法，顯著提高工作效率，省去培養(yǎng)基和相應設備，降低成本，便于大量生產(chǎn).在移栽作業(yè)中，我們還發(fā)現(xiàn)，可以將藍莓組培苗切段，2芽一段扦插于腐苔蘚中，控制好溫度與濕度，生根與成活率很好，極大的增加了繁殖系數(shù).
2.4組培苗移栽當苗根長到1~1.5cm時，打開瓶蓋，取出小苗，洗凈培養(yǎng)基，（幼枝上沾有培養(yǎng)基，常會引起幼枝發(fā)生腐爛，應注意避免）.用多菌靈500~800倍液浸泡30min左右，然后栽入0.1%高錳酸鉀消毒過的苗床上.苗床基質分5個處理，分別為沙∶草炭土=1∶1、沙∶蛭石=1∶1、純沙、純蛭石、腐苔蘚.試驗結果表明，以腐苔蘚為基質最好，成活率最高80%以上.草炭土和沙半量配置也不錯，成活率50%以上.苔蘚用500倍多菌靈溶液浸泡撈出后稍瀝干水分，鋪到事先準備好的苗床上，壓平壓實，苔蘚厚度5~7cm.苗木移栽后，每天澆水一次，每周噴一次甲基托布津和營養(yǎng)液，每半月澆灌一次0.5%的FeSO4溶液，蓋塑料拱棚，保溫保濕，冬季溫室內維持15~25℃，夏秋在露地搭蔭棚遮擋直射陽光，棚溫不超過28℃，7天后逐漸增加通風量，并逐漸減少澆水，1個月后移栽到營養(yǎng)缽或者直接移栽大田[文秘站－中國最強免費！].移栽前在畦內撒少量草炭土，移栽后于生長季澆灌FeSO4溶液2~3次.移栽后當年生長量可達20~30cm，翌春可有部分植株開花結果.
3結論
3.1莖段、莖尖培養(yǎng)在A3系列培養(yǎng)基中的1/3MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.5mg/L上誘導增殖培養(yǎng)40~50d，繁殖系數(shù)8倍以上；
3.2生根培養(yǎng)以A5系列培養(yǎng)基中的1/4MS+IBA0.5mg/L最好，生根率達100%且每株可生5~10條根；
3.3移栽基質以腐苔蘚為最好，成活率達80%以上.4討論藍莓育苗可采用根蘗繁殖、根條繁殖、扦插繁殖[2—3]，但所需的繁殖材料增多，繁殖系數(shù)比較低，而組織培養(yǎng)能夠迅速去除病毒和更新品種，加快繁殖速度，短時間內能迅速增加苗木數(shù)量，可以形成規(guī)模化生產(chǎn)，因而有更大的優(yōu)勢，所以引種初期一般采用組培技術進行藍莓的生產(chǎn).對組織培養(yǎng)的藍莓苗應用于生產(chǎn)，人們通常會懷疑：品種優(yōu)良性狀是否有變化，結果是否延遲，產(chǎn)量是否降低，據(jù)觀察，由外植體誘導產(chǎn)生愈傷組織出苗，容易發(fā)生染色體變異，而由定芽發(fā)育成的幼枝變異少，是可以保持品種原有特性，用于生產(chǎn)性栽培的.因此，我們在繁育過程中通過激素調整試驗，避免通過愈傷組織成苗.藍莓組培苗移栽后當年生長量可達20~30cm，翌春可有部分植株開花結果，品種不同有差異.盛果期在5年左右，其壽命為50年.丹東地區(qū)現(xiàn)有人工栽培藍莓面積10~15hm2，主栽品種有藍豐（高叢）、北陸（半高叢）、北藍（半高叢）、北村（半高叢）、美登（矮叢）.其中前4個品種屬鮮果銷售優(yōu)良品種，美登適合做加工型品種.露地栽培的藍莓采果期在7月15日至8月15日，采收期可達1個月.溫室栽培的藍莓在5月20日結果.
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