微生物技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)中的一種,是生物技術(shù)的重要組成部分。下面小編給大家分享微生物技術(shù)論文2000字，大家快來跟小編一起欣賞吧。
論文摘要：目的 驗(yàn)證氨金黃敏顆粒的微生物限度檢查方法是否適用于該供試品的檢查。方法 細(xì)菌計(jì)數(shù)采用低速離心―培養(yǎng)基稀釋法，霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)按常規(guī)檢查法，控制菌按常規(guī)檢查法。結(jié)果 稀釋劑對照組的菌回收率大于70%，試驗(yàn)組的菌回收率大于70%;陰性對照組未檢出陰性對照菌，試驗(yàn)組檢出陽性試驗(yàn)菌。結(jié)論 可以用該微生物限度檢查法進(jìn)行氨金黃敏顆粒的檢查。
主題詞： 氨金黃敏顆粒 檢驗(yàn)
中圖分類號：R122.1+2
為了保證檢驗(yàn)方法的科學(xué)性，現(xiàn)對某公司生產(chǎn)的氨金黃敏顆粒的微生物限度檢查方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。
一、材料與儀器
1 、試驗(yàn)樣品 藥品名稱：氨金黃敏顆粒，批號：090901、090902、090903。
2、 驗(yàn)證用儀器
電熱恒溫干燥箱、電冰箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、蒸汽滅菌鍋、集菌儀等。
玻璃器皿 錐形瓶、培養(yǎng)皿、量筒、試管、吸管等。
3、 驗(yàn)證用菌種 金黃色葡萄球菌;大腸埃希菌;枯草芽孢桿菌;白色念珠菌;黑曲霉。
4 、驗(yàn)證用培養(yǎng)基及稀釋劑 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基;玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基;膽鹽乳糖培養(yǎng)基;營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基;改良馬丁培養(yǎng)基;曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基。
二、 驗(yàn)證條件
無菌室環(huán)境潔凈度為10000級，局部潔凈度為100級，凈化消毒30min以上，供試品及滅菌的器具等經(jīng)傳遞窗紫外殺菌燈照射30min置無菌室內(nèi)，試驗(yàn)人員手消毒后穿無菌服進(jìn)入操作間。
三、方法與結(jié)果
1 、菌液制備 接種金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的新鮮斜面培養(yǎng)物接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，分別取各菌種培養(yǎng)液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋，金黃色葡萄球菌稀釋至10-5，大腸埃希菌稀釋至10-7，枯草芽孢桿菌稀釋至10-5， 約為50～100cfu/ml，備用。
接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于23～28℃培養(yǎng)23～48小時(shí)，取培養(yǎng)液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋至10-5，約為50～100cfu/ml，備用。
取黑曲霉的新鮮斜面培養(yǎng)物，用0.9%無菌氯化鈉溶液5ml將孢子洗下，吸取此溶液1ml置一個(gè)無菌的'比色管中，加0.9%無菌氯化鈉溶液適量與標(biāo)準(zhǔn)比濁管進(jìn)行比濁，取比濁后的菌懸液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋至10-4，約為50～100cfu/ml，備用。
2 、供試液制備 取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀分散混勻，作為1∶10的供試液。
3、細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證試驗(yàn)
試驗(yàn)組 細(xì)菌計(jì)數(shù)采用低速離心―培養(yǎng)基稀釋法，取1∶10供試液10ml，500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取全部上清液，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液補(bǔ)足至原量，混勻，再從中取1ml分別加入5個(gè)平皿中(每皿0.2ml)，加入各陽性細(xì)菌試驗(yàn)菌1ml，立即傾注相應(yīng)的瓊脂培養(yǎng)基，置32℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，測定細(xì)菌數(shù)。霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)采用常規(guī)法，取1∶10供試液1ml，加入各霉菌及酵母菌試驗(yàn)菌1ml，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，置25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，測定霉菌及酵母菌數(shù)。
菌液組 取稀釋好的各菌液1ml，分別加入平皿中，加入相應(yīng)培養(yǎng)基，置規(guī)定條件培養(yǎng)，測定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。
供試品對照組 按試驗(yàn)組方法，測定供試品本底菌數(shù)。
稀釋劑對照組 取稀釋劑替代供試液，方法同試驗(yàn)組。
試驗(yàn)組菌回收率(%)={(試驗(yàn)組平均菌落數(shù)-供試品對照組平均菌落數(shù))/菌液組平均菌落數(shù)}×100%
稀釋劑對照組菌回收率(%)=(稀釋劑對照組平均菌落數(shù)/菌液組平均菌落數(shù))×100%
4 、控制菌檢查方法的驗(yàn)證
試驗(yàn)組 取1∶10的供試液10ml，置無菌條件下離心(500轉(zhuǎn)/分)5分鐘，取上清液置無菌試管中，pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液補(bǔ)足至原量，混勻，加至膽鹽乳糖培養(yǎng)基100ml中，再加陽性對照菌大腸埃希菌菌液1ml，搖勻，置35～37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時(shí)。大腸埃希菌濃度同細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)驗(yàn)證。
陰性對照組 方法同試驗(yàn)組，加入1ml陰性菌(即金黃色葡萄球菌，濃度同細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)驗(yàn)證)，置35～37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時(shí)。
3.5結(jié)果分析
3.5.1細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)論 在三次試驗(yàn)中，稀釋劑對照組的菌回收率均大于70%，試驗(yàn)組的菌回收率均大于70%，故可照供試液制備方法和計(jì)數(shù)法測定氨金黃敏顆粒的細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)。
3.5.2控制菌驗(yàn)證結(jié)論 在三次試驗(yàn)中，陰性對照組未檢出陰性對照菌，試驗(yàn)組檢出陽性試驗(yàn)菌，故可用此供試液制備法和控制菌檢查法進(jìn)行氨金黃敏顆粒的控制菌檢查。
四、討論
1、 許多藥品本身的特性(如抑菌性)會對檢驗(yàn)結(jié)果帶來影響，需要對供試品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，以消除其本身帶來的干擾。
2 、藥品的微生物檢查是保證藥品使用安全的重要檢查項(xiàng)目，必須對每個(gè)品種的檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
3 、試驗(yàn)過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)范，保證結(jié)果的可靠性。
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